発表論文

 

2017

1. Miyake K, Shibata T, Ohto U, Shimizu T. Emerging roles of the processing of nucleic acids and Toll-like receptors in innate immune responses to nucleic acids. J Leukoc Biol. 2017, 101:135-142

2. Morita N, Yamai I, Takahashi K, Kusumoto Y, Shibata T, Kobayashi T, Nonaka MI, Ichimonji I, Takagi H, Miyake K, Takamura SA. C4b binding protein negatively regulates TLR1/2 response. Innate Immun. 2017, 23:11-19

3. Furukawa S, Moriyama M, Miyake K, Nakashima H, Tanaka A, Maehara T, Iizuka-Koga M, Tsuboi H, Hayashida JN, Ishiguro N, Yamauchi M, Sumida T, Nakamura S. Interleukin-33 produced by M2 macrophages and other immune cells contributes to Th2 immune reaction of IgG4-related disease. Sci. Rep. 2017, 7:42413

4. Pohar J, Yamamoto C, Fukui R, Cajnko MM, Miyake K, Jerala R, Benčina M. Selectivity of Human TLR9 for Double CpG Motifs and Implications for the Recognition of Genomic DNA. J. Immunol.2017, 198:2093-2104

5. Murakami Y, Fukui R, Motoi Y, Shibata T, Saitoh SI, Sato R, Miyake K. The protective effect of the anti-Toll-like receptor 9 antibody against acute cytokine storm caused by immunostimulatory DNA. Sci. Rep. 2017, 7:44042

6. Morita N, Yamazaki T, Murakami Y, Fukui R, Yamai I, Ichimonji I, Nakashima A, Nagaoka F, Takagi H, Miyake K, Akashi-Takamura S. C4b-binding protein negatively regulates TLR4/MD-2 response but not TLR3 response. FEBS Lett. 2017, 591:1732-1741

7. Oka M, Hashimoto K, Yamaguchi Y, Saitoh SI, Sugiura Y, Motoi Y, Honda K, Kikko Y, Ohata S, Suematsu M, Miura M, Miyake K, Katada T, Kontani K. Arl8b is required for lysosomal degradation of maternal proteins in the visceral yolk sac endoderm of mouse embryos. Cell Sci. 2017, 130:3568-3577

8. Iijima J, Kobayashi S, Kitazume S, Kizuka Y, Fujinawa R, Korekane H, Shibata T, Saitoh SI, Akashi-Takamura S, Miyake K, Miyoshi E, Taniguchi N. Core fucose is critical for CD14-dependent Toll-like receptor 4 signaling. Glycobiology 2017, 27:1006-1015

9. Sato R, Shibata T, Tanaka Y, Kato C, Yamaguchi K, Furukawa Y, Shimizu E, Yamaguchi R, Imoto S, Miyano S, Miyake K. Requirement of glycosylation machinery in TLR responses revealed by CRISPR/Cas9 screening. Int. Immunol. 2017, 29:347-355

10. Saitoh SI, Abe F, Kanno A, Tanimura N, Mori Saitoh Y, Fukui R, Shibata T, Sato K, Ichinohe T, Hayashi M, Kubota K, Kozuka-Hata H, Oyama M, Kikko Y, Katada T, Kontani K, Miyake K. TLR7 mediated viral recognition results in focal type I interferon secretion by dendritic cells. Nat. Commun. 2017, 8:Article Number 1592

ページの先頭に戻る

 

2016

1. Fukui R, Kanno A, Miyake K. Type I IFN Contribute to the Phenotypes of Unc93b1D34A/D34A Mice by Regulating TLR7 Expression in B Cells and Dendritic Cells. J. Immunol. 2016, 196:416-427

概要:Unc93b1D34A/D34Aマウス (D34Aマウス)はTLR7とTLR9の応答バランスが破綻し、TLR7が過剰応答することによって致死的な自然炎症が誘導されます。D34Aマウスの表現型に影響を与える因子を調べるため、各種サイトカインやインターフェロンの関与を調べたところ、I型インターフェロン受容体 (IFNAR1)をノックアウトしたD34Aマウスでは表現型が緩和されました。
 I型インターフェロンのシグナルは、B細胞におけるTLR7の発現維持に必要であるとの報告がなされています。IFNAR1をノックアウトしたD34AマウスにおいてもB細胞のTLR7発現量が低下し、TLR7リガンドに対する応答性が減弱していました。さらに、D34Aマウスの脾臓ではTLR7陽性樹状細胞の増加が認められますが、I型インターフェロンシグナルの欠損により、TLR7陽性樹状細胞の割合が減少しました。
  以上より、I型インターフェロンシグナルはB細胞と樹状細胞において異なる様式でTLR7の発現量を維持し、TLR7依存的な炎症に関わっていることが示唆されました。

2. Pelka K, Shibata T, Miyake K, Latz E. Nucleic acid-sensing TLRs and autoimmunity: novel insights from structural and cell biology. Immunol. Rev. 2016, 269:60-75

3. Watanabe Y, Nagai Y, Honda H, Okamoto N, Yamamoto S, Hamashima T, Ishii Y, Tanaka M, Suganami T, Sasahara M, Miyake K, Takatsu K. Isoliquiritigenin Attenuates Adipose Tissue Inflammation in vitro and Adipose Tissue Fibrosis through Inhibition of Innate Immune Responses in Mice. Sci. Rep. 2016, 6:23097

4. Tanji H, Ohto U, Motoi Y, Shibata T, Miyake K, Shimizu T. Autoinhibition and relief mechanism by the proteolytic processing of Toll-like receptor 8. PNAS 2016, 113:3012-3017

5. Shibata T, Ohto U, Nomura S, Kibata K, Motoi Y, Zhang Y, Murakami Y, Fukui R, Ishimoto T, Sano S, Ito T, Shimizu T, Miyake K. Guanosine and its modified derivatives are endogenous ligands for TLR7. Int. Immunol. 2016, 28:211-222

6. Honda S, Sato K, Totsuka N, Fujiyama S, Fujimoto M, Miyake K, Nakahashi-Oda C, Tahara-Hanaoka S, Shibuya K, Shibuya A. Marginal zone B cells exacerbate endotoxic shock via interleukin-6 secretion induced by Fcα/μR-coupled TLR4 signalling. Nat. Commun. 2016, 7:11498

7. Maekawa S, Ohto U, Shibata T, Miyake K, Shimizu T. Crystal structure of NOD2 and its implications in human disease. Nat. commun. 2016, 7:11813

8. Thomas Jennings R, Odkhuu E, Nakashima A, Morita N, Kobayashi T, Yamai I, Tanaka M, Suganami T, Haga S, Ozaki M, Watanabe Y, Nagai Y, Takatsu K, Kikuchi-Ueda T, Ichimonji I, Ogawa Y, Takagi H, Yamazaki T, Miyake K, Akashi-Takamura S. Inflammatory responses increase secretion of MD-1 protein. Int. Immunol. 2016, 28:503-512

9. Zhang Z, Ohto U, Shibata T, Krayukhina E, Taoka M, Yamauchi Y, Tanji H, Isobe T, Uchiyama S, Miyake K, Shimizu T. Structural Analysis Reveals that Toll-like Receptor 7 Is a Dual Receptor for Guanosine and Single-Stranded RNA. Immunity 2016, 45:737-748

ページの先頭に戻る

 

2015

1. Chan MP, Onji M, Fukui R, Kawane K, Shibata T, Saitoh S, Ohto U, Shimizu T, Barber GN, Miyake K. DNase II-dependent DNA digestion is required for DNA sensing by TLR9. Nat. Commun. 2015, 6:Article number 5853, doi:10.1038/ncomms6853

概要:Toll-like receptor9 (TLR9)は一本鎖DNAを認識して、免疫応答を惹起する自然免疫系の担当分子です。TLR9が認識するDNAは細菌やウイルスなどの病原体に由来するものの他に、宿主に由来するものも存在します。したがって、TLR9のDNA認識メカニズムの解明は感染症や自己免疫疾患などを理解する上で、重要な研究課題であると考えられています。
 今回我々は、DNAを分解する酵素であるDNaseIIが、TLR9によるDNA認識に関わっていることを発見いたしました。DNaseIIを欠損したマウスから誘導した樹状細胞は、人工的なTLR9リガンドとして知られているCpG-ODNのうち、CpG-Aと呼ばれるタイプのリガンドへの応答性が減弱します。一方、CpG-Bと呼ばれるタイプのリガンドへの応答性に変化は見られませんでした。これらのCpG-ODNはどちらも20塩基程度のDNAですが、CpG-Aは中央部がDNaseIIによって切断されるような構造を持っています。DNaseIIが欠損するとCpG-Aが切断されなくなる可能性を考え、試験管内でDNaseIIによるCpG-Aの切断実験を行ったところ、概ね半分程度の長さになることがわかりました。そこで、11塩基から13塩基程度の長さを持つCpG-Aの3'側で樹状細胞を刺激したところ、DNaseIIの有無に関わらずTLR9の応答性を見ることができました。CpG-Aは複合体を形成しやすいことが知られているため、そのままではTLR9に認識されづらいと予想されます。以上の結果から、DNaseIIにはDNAリガンドを切断することで、TLR9に認識されやすい構造にする働きがあると結論づけました。
 さらに、DNaseIIはCpG-ODNのような人工的なリガンドだけではなく、細菌由来のDNAといった天然のリガンドに対するTLR9の応答にも関わっていることが証明されました。今後はDNaseIIがTLR9の応答に与える機能を検討していくことで、TLR9が影響を及ぼす感染症や、ワクチンのアジュバント開発などにおいて新たな知見が得られると期待されます。

2. Kanno A, Tanimura N, Ishizaki M, Ohko K, Motoi Y, Onji M, Fukui R, Shimozato T, Yamamoto K, Shibata T, Sano S, Sugahara-Tobinai A, Takai T, Ohto U, Shimizu T, Saitoh S, Miyake K. Targeting cell surface TLR7 for therapeutic intervention in autoimmune diseases. Nat. Commun. 2015, 6:Article number 6119, doi:10.1038/ncomms7119

概要:Toll like receptor 7(TLR7)は外来微生物由来の一本鎖RNAを認識することで生体防御に関わっています。しかし、自己に由来するRNAにも応答し炎症を引き起こす可能性が指摘されています。実際に、全身性エリテマトーデスモデルマウスにおいて、核酸に対する自己抗体の産生にTLR7が関わっていることが報告されています。また当研究室では、TLRの局在を制御する分子Unc93B1のノックインマウス(Unc93b1D34A/D34Aマウス)がTLR7の自発的な過剰応答によって、脾腫や肝炎、血小板減少症などの病態を引き起こすことを見出しています。そのため、TLR7の応答は厳密に制御される必要があります。自己核酸はヌクレアーゼによって速やかに分解されるが、病原体由来の核酸は菌体膜やウイルス粒子などによって分解を免れ、エンドリソソームにまで到達します。したがって、TLR7は細胞内のエンドリソソームでのみ核酸を認識することで、自己核酸への応答を抑制していると考えられてきました。
 我々は生体内のTLR7の挙動を精査するために、TLR7に対するモノクローナル抗体を樹立しました。抗TLR7抗体を用いて、内在性TLR7の発現を解析したところ、マクロファージや樹状細胞表面にも発現していることが明らかになりました。TLR7の細胞表面発現はUnc93B1機能欠損マウスである3dマウスでは検出されません。そのため、Unc93B1がTLR7の細胞表面発現にも必須であると考えられます。さらに、骨髄細胞から誘導したマクロファージ及び樹状細胞におけるTLR7依存的サイトカイン産生を、この抗体は濃度依存的に抑制することも見出しています。そこで、抗TLR7抗体が、TLR7依存性の病態を制御するのかを検討するために、Unc93b1D34A/D34Aマウスへの継続的な抗TLR7抗体投与を行いました。その結果、コントロール抗体投与群と比較して、抗TLR7抗体投与群では血小板減少や脾腫、肝炎が有意に改善されました。
 従来、TLR7は細胞内部にのみ存在するとされていたため、抗体医薬を外から加えても、抑制はできないと予想されていました。しかし、我々の研究結果ではTLR7は細胞表面にも存在し、これを標的とした抗体によってTLR7応答を制御しうることを示すことができました。

3. Tanji H, Ohto U, Shibata T, Taoka M, Yamauchi Y, Isobe T, Miyake K, Shimizu T. Toll-like receptor 8 senses degradation products of single-stranded RNA. Nat Struct Mol Biol. 2015, 22:109-115

4. Nündel K, Green NM, Shaffer AL, Moody KL, Busto P, Eilat D, Miyake K, Oropallo MA, Cancro MP, Marshak-Rothstein A. Cell-intrinsic expression of TLR9 in autoreactive B cells constrains BCR/TLR7-dependent responses. J. Immunol. 2015, 194:2504-2512

5. Ohto U, Shibata T, Tanji H, Ishida H, Krayukhina E, Uchiyama S, Miyake K, Shimizu T. Structural basis of CpG and inhibitory DNA recognition by Toll-like receptor 9. Nature 2015, 520:702-705

6. Kimura T, Endo S, Inui M, Saitoh S, Miyake K, Takai T. Endoplasmic Protein Nogo-B (RTN4-B) Interacts with GRAMD4 and Regulates TLR9-Mediated Innate Immune Responses. J. Immunol. 2015, 194:5426-5436

7. Pohar J, Lainšček D, Fukui R, Yamamoto C, Miyake K, Jerala R, Benčina M. Species-Specific Minimal Sequence Motif for Oligodeoxyribonucleotides Activating Mouse TLR9. J. Immunol. 2015, 195:4396-4405

ページの先頭に戻る

2014

1. Tanimura N, Saitoh SI, Ohto U, Akashi-Takamura S, Fujimoto Y, Fukase K, Shimizu T, Miyake K. The attenuated inflammation of MPL is due to the lack of CD14-dependent tight dimerization of the TLR4/MD2 complex at the plasma membrane. Int. Immunol. 2014, 26:307-314

2. Murakami Y, Fukui R, Motoi Y, Kanno A, Shibata T, Tanimura N, Saitoh S, Miyake K. Roles of the cleaved N-terminal TLR3 fragment and cell surface TLR3 in double-stranded RNA sensing. J. Immunol. 2014, 193:5208-5217

3. Huh JW, Shibata T, Hwang M, Kwon EH, Jang MS, Fukui R, Kanno A, Jung DJ, Jang MH, Miyake K, Kim YM. UNC93B1 is essential for the plasma membrane localization and signaling of Toll-like receptor 5. Proc Natl Acad Sci U S A. 2014, 111:7072-7077

4. Motoi Y, Shibata T, Takahashi K, Kanno A, Murakami Y, Li X, Kasahara T, Miyake K. Lipopeptides are signaled by Toll-like receptor 1, 2 and 6 in endolysosomes. Int. Immunol. 2014, 26:563-573

5. Miyake K, Kaisho T. Homeostatic inflammation in innate immunity. Curr Opin Immunol. 2014, 30:85-90

6. Latz E, Miyake K. Editorial overview: Special section: effects of endogenous immune stimulants: from a defence system against infection to a homeostatic mechanism linking metabolism with inflammation. Curr Opin Immunol. 2014, 30:viii-ix

7. Li X, Saitoh SI, Shibata T, Tanimura N, Fukui R, Miyake K. Mucolipin 1 positively regulates TLR7 responses in dendritic cells by facilitating RNA transportation to lysosomes. Int. Immunol. 2014, doi: 10.1093/intimm/dxu086 [Epub ahead of print]

ページの先頭に戻る